NMY51菌株

名 稱

NMY51菌株

貨 號(hào)

TW-CC3480

品 牌

通蔚生物

細(xì)胞規(guī)格

100μl

儲(chǔ) 存

-20℃

菌株抗性

無抗

培養(yǎng)基

YPDA

菌株類別

酵母菌

培養(yǎng)條件

28℃，有氧，YPDA

基因型

MATahisΔ200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4-HIS3ura3::(lexAop)8-lacZ ade2::(lexAop) 8-ADE2 GAL4

質(zhì)粒轉(zhuǎn)化

電轉(zhuǎn)

保存方式

30%甘油，-20℃

基本應(yīng)用

酵母雙雜交

菌株簡(jiǎn)介

DUALmembrane系統(tǒng)是DUALsystems BioTech公司開發(fā)的專門篩選跨膜蛋白間相互作用的檢測(cè)技術(shù)，它利用分離的泛素系統(tǒng)（split-ubiquitin）直接檢測(cè)天然狀態(tài)下膜蛋白間的相互作用，是目前市面上唯一檢測(cè)膜蛋白間相互作用的酵母雙雜系統(tǒng)。此系統(tǒng)采用NMY51酵母菌株，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn)；此菌株Transformation  marker為:  trp1, leu2-3，報(bào)告基因?yàn)椋篐IS3, ADE2 和 lacZ，第一步通過營(yíng)養(yǎng)缺陷型報(bào)告基因（HIS3, ADE2）進(jìn)行選擇性生長(zhǎng)篩選，進(jìn)一步通過 LacZ 報(bào)告基因進(jìn)行β-半乳糖分析顯色的定量或半定量篩選，三個(gè)獨(dú)立的報(bào)告基因，受不同啟動(dòng)子的調(diào)控，降低假陽性幾率。原理：泛素（ubiquitin）分子量很小，由 76aa 殘基組成；泛素作為降解信號(hào)分子，可以連接另外一種蛋白質(zhì)的 N 端，然后被泛素專一性蛋白酶（UBPs）識(shí)別，從而導(dǎo)致與泛素相連的蛋白被酶解。泛素可以人為分成兩部分：N 端（Nub），C 端（Cub）。首先，人為地將泛素 Nub 的 3 位異亮氨酸突變?yōu)楦拾彼幔∟ubI 突變?yōu)?NubG）。這樣與 Cub 的親合力大大降低，避免了 Cub 和 Nub 自我結(jié)合或接近的可能性。其次，將Cub 部分與人工合成的 LexA-VP16 轉(zhuǎn)錄激活因子融合成一個(gè)融合蛋白Cub-LexA-VP16。正常條件下 NubG不與Cub 結(jié)合，UBPs 也不能識(shí)別分離的泛素，轉(zhuǎn)錄激活因子也不會(huì)被切下來。最后，將要檢測(cè)的蛋白質(zhì)分別與NubG和Cub融合，形成 bait 融合蛋（bait-cub-LexA -VP16）和 prey 融合蛋白（prey-NubG）。如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用，就會(huì)促使 NubG 和 Cub 的相互接近，被 UBPs 識(shí)別，導(dǎo)致 LexA-VP16 的解離，進(jìn)入核內(nèi)，從而激活報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。 此系統(tǒng)可使用四種Bait質(zhì)粒：pBT3-N，pBT3-SUC，pBT3-STE，pBT3-C，篩選標(biāo)志均為L(zhǎng)EU；三種Prey質(zhì)粒：pPR3-C ，pPR3-SUC，pPR3-STE，篩選標(biāo)志均為TRP。NMY51酵母菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng)，然后使用30%的甘油保藏菌種。

供應(yīng)范圍

僅供限于科研實(shí)驗(yàn)研究

運(yùn)輸方式

低溫快遞運(yùn)輸

菌株優(yōu)勢(shì)

通蔚生物菌株庫(kù)擁有200種菌株 , 遺傳性狀一致

特別說明

細(xì)胞購(gòu)買/細(xì)胞培養(yǎng)/動(dòng)物血清/實(shí)驗(yàn)服務(wù)/原代提取/菌株購(gòu)買，請(qǐng)立即與通蔚生物聯(lián)系

售后服務(wù)

細(xì)胞予重發(fā)

1.細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)。

2.收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。

3.收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。

4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。

5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。

6.細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。

細(xì)胞不予重發(fā)

1.客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)。

2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。

3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。

4.細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。

5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。

6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的，不重發(fā)。

特別說明

上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以撥打免費(fèi)服務(wù)電話021-54845833/15800441009，我們隨時(shí)給予實(shí)驗(yàn)中的免費(fèi)解答。