兔腹腔巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 :兔腹腔巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來(lái)源 :腹腔液
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介
兔腹腔巨噬細(xì)胞分離自腹腔。腹腔,即軀干腹部的腔,內(nèi)襯腹膜,由體壁、橫膈膜和盆底圍成,其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件) 等其他內(nèi)臟器官。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。
巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長(zhǎng)期生存。巨噬細(xì)胞(M acrophages) 是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來(lái)源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫) 和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫) 。
它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化) ,并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。巨噬細(xì)胞功能及其在疾病發(fā)生過(guò)程中的作用是目前研究的熱點(diǎn)問(wèn)題之一。腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。
方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹腔巨噬細(xì)胞采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)C D 68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 :屬于終末分化細(xì)胞。屬于不增殖細(xì)胞群
傳代比例 :不傳代
消 化 液 :利多卡因(12m M )
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%
兔腹腔巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
兔腹腔巨噬細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈巨噬細(xì)胞樣,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞屬于終末分化細(xì)胞。屬于不增殖細(xì)胞群。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 特殊細(xì)胞消化一
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加利多卡因(12m M ) 消化液1m L至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,37℃溫浴3min(不能超過(guò)5min) 。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5m l完全培養(yǎng)基稀釋消化液。
3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞,吸出細(xì)胞懸液,經(jīng)1200rpm 離心5min,丟棄上清。
4) 用完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù)接種于相應(yīng)實(shí)驗(yàn)器具內(nèi),待細(xì)胞完全貼壁后開(kāi)始試驗(yàn)(預(yù)計(jì)
2h 貼壁,12-24h 完全展開(kāi)) 。
5) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 特殊細(xì)胞消化二
1) 若細(xì)胞無(wú)法消化,更換消化液為0. 25% 胰蛋白酶,按照上述消化一方案操作。
2) 若仍然無(wú)法消化,加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化,采用無(wú)菌細(xì)胞刮,直接刮取細(xì)胞(此法不推薦,最后選擇,會(huì)造成細(xì)胞機(jī)械損傷死亡) 。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。