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021-54845833/15800441009
細(xì)胞信息
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細(xì)胞名稱 |
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細(xì)胞品牌 |
通蔚生物 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
食管 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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細(xì)胞形態(tài) |
成纖維細(xì)胞樣 |
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細(xì)胞簡介 |
食管是咽和胃之間的消化管，哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，其中外膜主要都是成纖維細(xì)胞構(gòu)成的疏松結(jié)締組織，食管通過其與食管周圍的器官相連。黏膜下層,為厚的疏松結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)部包含食管腺，可分泌粘液排入食管腔。 食管癌的發(fā)生中由正常成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的活化的癌相關(guān)纖維母細(xì)胞是腫瘤間質(zhì)微環(huán)境內(nèi)的主要效應(yīng)細(xì)胞，研究證實(shí)，包括食管癌在內(nèi)的多種腫瘤組織內(nèi)的癌相關(guān)纖維母細(xì)胞，與正常成纖維細(xì)胞相比，在形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長方式、增殖活性、運(yùn)動能力等發(fā)面均發(fā)生了顯著變化，并且能夠分泌大量的促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、血管新生的信號分子以介導(dǎo)上皮-間質(zhì)之間復(fù)雜的相互作用。 |
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質(zhì)量檢測 |
纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等 |
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細(xì)胞規(guī)格 |
5x10?cells/T25或1mL凍存管 |
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培養(yǎng)基 |
人食管成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
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培養(yǎng)條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
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換液頻率 |
每2-3天換液一次 |
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消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
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細(xì)胞貨期 |
7-8周左右 |
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發(fā)貨方式 |
復(fù)蘇發(fā)貨（免運(yùn)輸費(fèi)用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用） |
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供應(yīng)范圍 |
僅限于科研實(shí)驗(yàn)使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 |
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特別說明 |
具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作
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收貨處理 |
取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) |
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傳代密度 |
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) |
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傳代比例 |
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
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傳代方法
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1. 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次； 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化； 3. 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)； 4. 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。 |
注意事項(xiàng)
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重要提醒 |
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。 3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4. 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 |
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到貨須知 |
1. 收到細(xì)胞后，首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否完全揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2 .靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照），記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。 2. 由于運(yùn)輸?shù)脑?，部分?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。 |
售后服務(wù)
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細(xì)胞予重發(fā) |
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1. 細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)。 |
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2. 收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。 |
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3. 收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。 |
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4. 常溫發(fā)貨細(xì)胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨細(xì)胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。 |
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5. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。 |
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6. 細(xì)胞活性問題在收到產(chǎn)品3天內(nèi)提出真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。 |
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細(xì)胞不予重發(fā) |
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1. 客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)。 |
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2. 客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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3. 非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。 |
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5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。 |
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6. 收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。 |
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特別說明 |
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上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以撥打免費(fèi)服務(wù)電話021-54845833或15800441009，我們隨時給予實(shí)驗(yàn)中的免費(fèi)解答。 |
