SW480人結(jié)腸癌細(xì)胞(L15)
基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 : 人結(jié)腸癌細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 : SW 480 [SW -480]
細(xì)胞形態(tài) : 上皮細(xì)胞樣
生長特性 : 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,100% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO 液氮
完全培養(yǎng)基 : Leibovitz's L-15(PM151010)+10% FBS(164210-50)+1%P/S(PB180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時間 : 2~ 3分鐘
換液頻次 : 2~ 3次/周
傳代比例(密度) : 1:2-1:4
細(xì)胞背景描述
SW 480 [SW -480]細(xì)胞源自原位直腸腺癌,和SW 620細(xì)胞源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。CSAp和直腸抗體3陰性;角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G →A突變引起A rg→His替代,309位密碼子的C →T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代。細(xì)胞p53蛋白表達(dá)水平提高,癌基因c-m yc、K -ras、H -ras、N -ras、m yb、sis和 fo s的表達(dá)呈陽性,癌基因N -m yc的表達(dá)未做檢測。SW 480 [SW -480]細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞溶解酶,一種與腫瘤入侵相關(guān)的金屬蛋白酶。有報道稱,SW 480 [SW -480]細(xì)胞表達(dá)G M -C SF。SW 480 [SW -480]細(xì)胞 ras原癌基因的12位密碼子有一個突變,可以用作PC R 法檢測該突變的陽性對照。1978年11月,ALeibovitz將其提交給ATCC時已傳代至第91代。
致 瘤 性 : Yes.Tum orsdeveloped within 21 daysat100% frequency (5/5)in nudemiceinoculated subcutaneouslywith 1×10^7 cells.
倍增時間 : 30-50小時
受體表達(dá) : epiderm algrow th factor(EG F)
細(xì)胞類型 : 腫瘤細(xì)胞
基因表達(dá) : carcinoem bryonic antigen (C EA)0.7 ng/10^6 cells/10 days;k eratin;tran sfo rming grow th factorbeta,m yc+;m yb+;ras+;fo s+;sis+;p53+;abl-;ros-;src -,HLA A2,B8,B17;Blood TypeA;Rh+,The cellsare positive fork eratinbyim m unoperoxidase staining.,T helineispositive forexpression ofc-m yc,K -ras,H -ras,N -ras,myb,sisand fosoncogenes.
組織來源 : 直腸;結(jié)直腸腺癌
腫瘤類型 : 腸癌細(xì)胞
生物安全等級 : 1
供體年齡男性 : 50歲
細(xì)胞保藏中心 : ATCC ; C C L-228D SM Z ; ACC-313ECACC ; 87092801
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照酶聯(lián)生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75% 酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔?xì)胞有疑問,請及時跟我們聯(lián)系;對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)注意事項有疑問的,可跟我們的技術(shù)支持交流。
售前須知
1、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz'sL-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),Leibovitz'sL-15不可以通入二氧化碳,會產(chǎn)生細(xì)胞毒性。
2、該細(xì)胞不建議更換為DMEM 培養(yǎng),圓形較多,效果不好。