產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 : 兔外周血白細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 : 通蔚生物
組織來(lái)源 : 血液組織
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介
兔外周血白細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中首次提出外周血這一新概念。白細(xì)胞是一類無(wú)色、球形、有核的血細(xì)胞。
白細(xì)胞不是一個(gè)均一的細(xì)胞群,根據(jù)其形態(tài)、功能和來(lái)源部位可以分為三大類:粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,其中粒細(xì)胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同,分為中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞三種。
根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無(wú)特殊顆粒,可將其分為有粒白細(xì)胞和無(wú)粒白細(xì)胞。前者常簡(jiǎn)稱為粒細(xì)胞,根據(jù)其特殊顆粒的染色特性,又分為中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞,白細(xì)胞也通常被稱為免疫細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到,血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少,具有細(xì)胞核;其主要作用是吞噬細(xì)菌、防御疾病。
方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血白細(xì)胞采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血白細(xì)胞經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 : 懸浮
細(xì)胞形態(tài) : 圓形
傳代特性 : 不增殖;不傳代
傳代比例 : 不傳代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
兔外周血白細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
兔外周血白細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈圓形,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞不增殖;不傳代;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 懸浮細(xì)胞處理
1)收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,用PBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液。
2)1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
3)加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞;將分散好的細(xì)胞調(diào)整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)若遇到懸浮細(xì)胞團(tuán)塊較大,無(wú)法機(jī)械吹散時(shí),向步驟2)中細(xì)胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結(jié)束后,加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細(xì)胞;1200rpm 離心5min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
5)加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6)待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。