產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 : 人前列腺基質(zhì)細胞
產(chǎn)品品牌 : 通蔚生物
組織來源 : 前列腺
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
人前列腺基質(zhì)細胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性特有的性腺器官;前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。
作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素”。常見疾病為良性前列腺增生,在病理學(xué)上良性前列腺增生癥又稱前列腺結(jié)節(jié)狀增生,是前列腺中最常見的產(chǎn)生癥狀的瘤樣病變,結(jié)節(jié)開始發(fā)生可能是基質(zhì)細胞自發(fā)逆轉(zhuǎn)至胚胎階段,其生長潛力可能是基質(zhì)-上皮之間的相互協(xié)同作用所致,最終形成前列腺增生。
基質(zhì)細胞是器官中結(jié)締組織細胞,起到為器官中實質(zhì)細胞提供支持和營養(yǎng)的作用,成纖維細胞、炎癥細胞、免疫細胞以及周皮細胞都是常見的基質(zhì)細胞類型?;|(zhì)細胞和腫瘤細胞的相互作用在腫瘤細胞的生長過程中具有重要作用。體外培養(yǎng)人前列腺基質(zhì)細胞對治療前列腺增生有重要的研究意義。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人前列腺基質(zhì)細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的人前列腺基質(zhì)細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 : 貼壁不包被
培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細胞形態(tài) : 成纖維細胞樣
傳代特性 : 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
人前列腺基質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
人前列腺基質(zhì)細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準操作流程下,細胞可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗??蛻羰盏郊毎?,請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。