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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 ： 大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 腸組織
產(chǎn)品規(guī)格 ： 5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介
大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞分離自腸組織；神經(jīng)嵴干細(xì)胞(neuralcrest stem cells，N C SC )，即外周神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞，起源于胚胎期的神經(jīng)管背側(cè)，與中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上有著顯著不同，N C SC 可表達低親和力神經(jīng)營養(yǎng)因子受體p75N T R 而不能分化出少突膠質(zhì)細(xì)胞，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞與之恰好相反。
N C SC 可在不同部位分化出多種組織，如神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、黑色素細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞、平滑肌、骨骼肌及骨等，其中可特異性分化出腸神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)的N C SC ，被稱為腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞(gutneuralcrest stemcells，G N CSC)。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞經(jīng)N estin免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ： 含B-27 Supplem ent、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 懸浮
細(xì)胞形態(tài) ： 球形
傳代特性 ： 可傳1-3代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈球形，在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳1-3代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳；建議您收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.懸浮細(xì)胞處理
1) 收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中，用PBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細(xì)胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞；將分散好的細(xì)胞調(diào)整合適
密度接種至培養(yǎng)器皿中，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 若遇到懸浮細(xì)胞團塊較大，無法機械吹散時，向步驟2)中細(xì)胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中，用吸-管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min，消化結(jié)束后，加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化，用吸管輕輕吹打，分散細(xì)胞；1200rpm 離心5min，棄上清，收集細(xì)胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻；按傳代比例進行接種傳代，然后補充
新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6) 待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
