酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)：ELISA 樣本處理

樣品的存儲(chǔ)：

1.避免污染：遵循制造商的指導(dǎo)來存儲(chǔ)樣品。

2.標(biāo)簽和密封： 確保樣品正確標(biāo)記和密封，以防止干燥或蒸發(fā)。

3.及時(shí)分析：盡快分析樣本以獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。

樣品采集：

1.遵守規(guī)則： 遵守樣本采集的法律準(zhǔn)則。

2.告知客戶： 讓客戶知道需要多少樣品。

3.反映狀況：確保結(jié)果準(zhǔn)確反映收到的樣本的狀況。

樣品制備：

1.遵循說明：遵循測試套件的說明來混合和提取分析物。

2.使用適當(dāng)?shù)脑O(shè)備： 確保所有設(shè)備合適且維護(hù)良好。

3.時(shí)間：分析前準(zhǔn)備樣品或按指示儲(chǔ)存。

使用冷凍樣品：

1.解凍： 根據(jù)分析物的穩(wěn)定性，在 4°C 或室溫下完全解凍樣品。

2.混合：徹底混合液體樣品，不要產(chǎn)生泡沫。

3.避免反復(fù)冷凍： 將樣品分裝于-20°C 下保存，以避免多次凍融循環(huán)并保持樣品質(zhì)量。

細(xì)胞培養(yǎng)上清液：

1.離心： 在 4°C 下以 1,500 rpm 的速度旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)基 10 分鐘。

2.儲(chǔ)存： 分裝并將上清液儲(chǔ)存于 -80°C。避免反復(fù)凍融。

細(xì)胞提取物：

1.準(zhǔn)備：將組織培養(yǎng)板放在冰上，并用冰冷的 PBS 清洗細(xì)胞。

2.提取：每 100 毫米平板添加 0.5 毫升提取緩沖液，刮下細(xì)胞，收集在冷卻的試管中，短暫渦旋，并在冰上孵育 15-30 分鐘。

3.離心： 4°C 下以 13,000 rpm 旋轉(zhuǎn) 10 分鐘。

4.儲(chǔ)存：分裝上清液并儲(chǔ)存于 -80°C。避免反復(fù)凍融。

條件培養(yǎng)基：

1.培養(yǎng)細(xì)胞：使用含血清的培養(yǎng)基直至細(xì)胞達(dá)到所需的匯合度。

2.準(zhǔn)備培養(yǎng)基： 用溫?zé)岬?/span> PBS 清洗，添加無血清培養(yǎng)基，孵育 1-2 天。

3.離心： 在 4°C 下以 1,500 rpm 的速度旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)基 10 分鐘。

4.儲(chǔ)存：分裝并將上清液儲(chǔ)存于 -80°C。避免反復(fù)凍融。

牛奶、尿液、唾液：

1.離心： 4°C 下以 10,000 xg 旋轉(zhuǎn) 2 分鐘。

2.儲(chǔ)存：分裝上清液并儲(chǔ)存于 -80°C。避免反復(fù)凍融。

等離子體：

1.收集血液： 使用抗凝管，在 4°C 下以 3,000 rpm 離心 10 分鐘。

2.儲(chǔ)存：分裝上清液（血漿）并儲(chǔ)存在 -80°C 下。避免反復(fù)凍融。

血清：

1.收集血液：使用未經(jīng)處理的試管，在室溫下孵育 20 分鐘。

2.離心： 4°C 下以 3,000 rpm 旋轉(zhuǎn) 10 分鐘。

3.儲(chǔ)存：分裝上清液（血清）并儲(chǔ)存在 -80°C 下。避免反復(fù)凍融。

組織提取物：

1.解剖組織： 在冰上操作，在液氮中快速冷凍。

2.提?。?/span> 每~5 mg 組織添加~300 μL 提取緩沖液，均質(zhì)化，然后沖洗刀片。

3.攪拌：在 4°C 下混合 2 小時(shí)，然后在 4°C 下以 13,000 rpm 離心 20 分鐘。

4.儲(chǔ)存：分裝上清液并儲(chǔ)存于 -80°C。避免反復(fù)凍融。

一般建議：

1.蛋白質(zhì)濃度： 目標(biāo)濃度為≥1-2 mg/mL。

2.稀釋： 用結(jié)合緩沖液將血清、血漿、細(xì)胞和組織提取物稀釋 50%。

3.離心解凍樣品：使用前在 4°C 下以 10,000 rpm 旋轉(zhuǎn) 5 分鐘。

存儲(chǔ)期限限制:

2-8°C：適合最多5天。

-20°C：適合長達(dá)6個(gè)月。

-80°C：可保存長達(dá) 2 年

液氮：適合通過適當(dāng)?shù)姆椒o限期保存。

避免反復(fù)凍融循環(huán):

1.將樣品分成更小的等份以減少多次凍融循環(huán)的需要。

2.在15-25°C水浴中快速解凍樣品并立即使用。

3.如果要重新冷凍，請?jiān)诮鈨龊罅⒓催M(jìn)行，以盡量減少樣品的降解。

套件的存儲(chǔ):

1.儲(chǔ)存于 2-8°C 干燥處；避免冷凍組件。

2.遵守標(biāo)簽上的有效期。

3.防止試劑盒凍結(jié)以避免損壞和無效結(jié)果。

先進(jìn)先出:

1.優(yōu)先使用有效期最短的套件。

2.請注意工具盒上的首次使用日期，以防止混淆。

預(yù)熱：

1.使用前將所有試劑恢復(fù)至室溫（20-25°C）。

2.使用后應(yīng)立即將組件放回儲(chǔ)存條件。

未使用組件的存儲(chǔ)：

1.將未使用的微量滴定板存放在裝有干燥劑的可重新密封的袋中。

2.將所有組件直立并安全關(guān)閉地存放。