一文解鎖ELISA檢測(cè)方法

  對(duì)于剛接觸這方面科研類的人群對(duì)ELISA檢測(cè)比較陌生，那么，ELISA檢測(cè)方法有哪些？今天由通蔚生物為大家詳細(xì)介紹一下。

  ELISA又叫酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（英文簡稱，ELISA）的簡稱。它是在免疫酶技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù)。

  認(rèn)識(shí)免疫酶技術(shù)？

  免疫酶技術(shù)是一種免疫檢測(cè)技術(shù)，它結(jié)合了抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶有效催化反應(yīng)的專一性。該技術(shù)將酶與抗體或抗原結(jié)合成酶標(biāo)記抗體或抗原，此結(jié)合物既保留了抗體或抗原的免疫學(xué)活性，同時(shí)又保留了酶對(duì)底物的催化活性。它以酶作為標(biāo)記物，與抗體或抗原聯(lián)結(jié)，與相應(yīng)的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應(yīng)作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學(xué)技術(shù)。

  ELISA檢測(cè)方法4種方法

• 直接法（Direct ELISA）：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體，即可測(cè)定抗原總量。此一級(jí)抗體的特異性非常重要。

     優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡短，因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。

• 間接法（Indirect ELISA）：此測(cè)定方法與直接法類似，差別在于一級(jí)抗體沒有酶標(biāo)記，改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測(cè)定抗原量。

     優(yōu)勢(shì)：二抗可以加強(qiáng)信號(hào)，而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析。不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它多的免疫反應(yīng)性。缺點(diǎn)：交互反應(yīng)發(fā)生的幾率較高。

• 雙抗體夾心法（Sandwich ELISA）：被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測(cè)抗體，此抗體可用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原的量；或不標(biāo)記，再透過酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測(cè)定抗原的量。

• 競爭法（Competitive ELISA）：此方法整體敏感性和專一性都較差。

  檢測(cè)過程注意事項(xiàng)：

1.   操作要規(guī)范，以減少交叉污染和誤差。
2.   確保所有試劑和設(shè)備均處于良好狀態(tài)。
3.   標(biāo)準(zhǔn)曲線的構(gòu)建和測(cè)定要精確，以保證待測(cè)樣品的濃度準(zhǔn)確。

  上文由通蔚生物為大家介紹了ELISA及檢測(cè)方法，希望對(duì)您在ELISA檢測(cè)過程有所幫助。如果對(duì)上文還有疑問不懂可以和通蔚在線客服溝通，我們會(huì)幫您解答。