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上海通蔚生物淺析ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵注意要點(diǎn)

發(fā)布時(shí)間:2024-08-05     發(fā)布作者:上海通蔚生物

上海通蔚生物自主研發(fā)ELISA試劑盒,現(xiàn)已涵蓋20多個(gè)種屬,數(shù)千種產(chǎn)品,涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個(gè)研究領(lǐng)域上海通蔚生物為大家總結(jié)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)至關(guān)重要的步驟有:

1 . 重要的洗滌:
不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景,從而帶來(lái)不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會(huì)增加背景噪音,有必要的話(huà),可增加洗滌液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過(guò)高,懷疑洗滌不夠時(shí),可以嘗試增加洗滌次數(shù)。

2 . 關(guān)鍵的封閉

封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位,這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì),如果背景過(guò)高,懷疑封閉不充分,那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當(dāng)延長(zhǎng)封閉時(shí)間。

目前主要有兩種類(lèi)型的封閉液:
蛋白和非離子型去污劑使用的類(lèi)型須取決于多個(gè)因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測(cè)試劑好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。




上海通蔚ELISA試劑盒


3 . 抗體濃度須優(yōu)化

如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景為了防止這一點(diǎn),切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。

4 . 檢測(cè)試劑要適量
切勿使用過(guò)多的檢測(cè)試劑,如果濃度過(guò)高,或者未正確稀釋?zhuān)瑒t會(huì)導(dǎo)致高背景。ELISA試劑盒也不要顯色過(guò)度,如有必要,優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。只有確保每一步操作都做到位,才會(huì)呈現(xiàn)完美的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以ELISA實(shí)驗(yàn)的每一步都很重要,不可以掉以輕心。

5.上海通蔚生物優(yōu)勢(shì)
上海通蔚實(shí)業(yè)有限公司擁有自己的實(shí)驗(yàn)室,備有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì),長(zhǎng)期致力于各種生物試劑,細(xì)胞,血清,ELISA試劑盒等科研產(chǎn)品的研發(fā)與銷(xiāo)售,ELISA實(shí)驗(yàn)提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),并提供精湛的技術(shù)服務(wù),更多實(shí)驗(yàn)資訊可咨詢(xún)我司業(yè)務(wù)員,如果您有實(shí)驗(yàn)上的問(wèn)題歡迎前來(lái)咨詢(xún),為您提供專(zhuān)業(yè)的一對(duì)一技術(shù)指導(dǎo)。