發(fā)布時間:2024-05-16 發(fā)布作者:上海通蔚生物
細胞培養(yǎng)基的目標是創(chuàng)造一個體外細胞增殖的環(huán)境。這主要通過培養(yǎng)箱(即溫度、濕度、O2和CO2張力)和基礎細胞培養(yǎng)基及其補充物來實現(xiàn)。細胞培養(yǎng)基不僅包括碳水化合物、維生素、氨基酸、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)的供應,還包含控制培養(yǎng)物pH值和細胞滲透壓等理化特性的成分。常見的細胞培養(yǎng)基包括DMEM、DMEM/F12等,它們針對不同細胞類型和實驗目的,在成分上有所差異。接下來上海通蔚生物給大家詳細介紹一下它們之間的區(qū)別。
Dulbecco's改良培養(yǎng)基--DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養(yǎng)基最初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng),例如成纖維細胞、HeLa細胞、雜交瘤細胞、原代細胞等。
DMEM/F-12培養(yǎng)基是將DMEM與Ham'sF-12培養(yǎng)基以1:1比例混合改良而來的。改良后的DMEM/F-12培養(yǎng)基,營養(yǎng)成分更為豐富,含有更多種微量元素,更適合對營養(yǎng)要求較高的細胞,例如一些神經(jīng)元細胞、上皮細胞、內(nèi)皮細胞等。它也常用于培養(yǎng)原代細胞,因為它能更好地模擬細胞在體內(nèi)的生長環(huán)境。DMEM/F-12廣泛應用于多種哺乳類細胞的培養(yǎng),也適用于低血清條件下哺乳動物細胞的培養(yǎng)以及高密度培養(yǎng)。
DMEM/F-12已成功應用于各種研究領域,包括神經(jīng)生物學、免疫學、癌癥研究、干細胞研究等。它已成功培養(yǎng)的細胞包括:
DMEM培養(yǎng)基富含氨基酸、維生素和碳水化合物,能夠提供細胞所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)。配方相對簡單,適用于大多數(shù)哺乳動物細胞的培養(yǎng),特別適用于培養(yǎng)腫瘤細胞、原代細胞、免疫細胞和成纖維細胞等。
DMEM/F12是DMEM和NutrientMixtureF-12(N-12)的混合培養(yǎng)基,結(jié)合了兩種培養(yǎng)基的優(yōu)點。含有更多的維生素、微量元素和成長因子,能夠更全面地滿足細胞的營養(yǎng)需求。適用于對培養(yǎng)基要求較高的細胞類型,如神經(jīng)細胞、肝細胞、乳腺上皮細胞等。
上述是2種細胞適用性主要區(qū)分,選擇使用哪種培養(yǎng)基應該根據(jù)你的實驗目的、細胞類型和實驗條件來進行綜合考慮。
使用DMEM和DMEM/F12培養(yǎng)基時,需要注意以下幾點:
1.培養(yǎng)細胞類型:DMEM適用于大多數(shù)哺乳動物細胞的培養(yǎng),而DMEM/F12通常適用于對培養(yǎng)基要求較高的細胞類型,如神經(jīng)細胞、肝細胞、乳腺上皮細胞等。因此,在選擇培養(yǎng)基時,需要根據(jù)你要培養(yǎng)的細胞類型來進行選擇。
2.添加補充物質(zhì):根據(jù)具體的實驗要求,你可能需要向DMEM或DMEM/F12培養(yǎng)基中添加額外的補充物質(zhì),如生長因子、抗生素、抗菌劑等。添加補充物質(zhì)時應遵循相關的實驗方案和標準操作規(guī)程。
3.細胞密度和培養(yǎng)時間:不同的細胞類型在DMEM或DMEM/F12培養(yǎng)基中可能具有不同的生長速率和最適生長密度。因此,在培養(yǎng)細胞時,需要根據(jù)細胞的生長特性和實驗要求來確定合適的細胞密度和培養(yǎng)時間。
4.培養(yǎng)條件:DMEM和DMEM/F12培養(yǎng)基通常需要在37攝氏度的恒溫培養(yǎng)箱中、含有5%~10%二氧化碳的濕潤環(huán)境下進行培養(yǎng)。確保培養(yǎng)條件的穩(wěn)定性和一致性對于細胞的健康生長非常重要。
5.培養(yǎng)基的更換和更新:培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子會隨著時間的推移而逐漸消耗和降解,因此需要定期更換和更新培養(yǎng)基,以維持細胞的健康生長和活力。
6.防止細菌和真菌污染:在培養(yǎng)細胞的過程中,需要采取嚴格的無菌操作措施,防止細菌和真菌的污染,從而保證細胞的純度和實驗結(jié)果的可靠性。
上述為大家介紹dmemf12和DMEM區(qū)別,選擇合適的培養(yǎng)基對于細胞培養(yǎng)的成功至關重要。不同類型的細胞具有不同的生長要求和對營養(yǎng)物質(zhì)的需求,因此選擇適合特定細胞類型的培養(yǎng)基可以提高細胞的生長速率、增殖能力和細胞功能的穩(wěn)定性,從而確保實驗結(jié)果的準確性和可重復性。