酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)是一種常用的血清學(xué)檢測方式。今天由小蔚為大家詳解酶聯(lián)免疫吸附實驗的工作原理及應(yīng)用。了解酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)如何檢測血清。
ELISA血清學(xué)檢測法通常在多孔微量板中進行,這樣可以很方便進行血清的稀釋和檢測。為了更好的理解ELISA工作原理,我們來仔細看看,在檢測時多孔板的其中的一個孔中發(fā)生什么。
在進行檢測前,先用目標抗原包被多孔板的每個孔(對于商業(yè)化的檢測),制造商會把這個步驟做好。
elisa檢測試劑盒
首先,在開始檢測時,我們會在測試孔中加入稀釋過的患者血清。如果病人血清中有相應(yīng)的
抗體,它們會與固定在孔底的抗原結(jié)合,只有抗原特異性抗體才會固定在孔中。
接著(用緩沖液)清洗這些孔,將所有未集合的抗體去除。然后,加入含有動物抗體的溶液(這里的動物抗體能夠抗人類的抗體)。這第二種抗體(動物抗體)上共價結(jié)合了一個酶。再次清洗這些孔,這次是為了清除去未結(jié)合的酶標記抗體。
最后,加入一種顯色溶液,這種溶液含有一種可以被酶催化顯色的底物。底物與第二種抗體上的酶相互作用??梢允谷芤撼尸F(xiàn)明顯的顏色。可以通過肉眼觀察或儀器定量讀取每個孔中特定抗體的顯示結(jié)果。
隨著血清不斷稀釋,和抗原結(jié)合的抗體量就會減少,反應(yīng)的顏色也會越來越淡,能出現(xiàn)顯色反應(yīng)的最高稀釋倍數(shù)就是所測樣品的特價。
上文是上海通蔚為大家介紹酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測血清的原理及應(yīng)用,您對血清檢測原理了解多少呢?在進行酶聯(lián)免疫吸附實驗過程要遵循說明書和注意事項,確保實驗結(jié)果的準確性。