利鈉肽(BrainNatriureticPeptide)是心臟和血管產(chǎn)生的蛋白質,它主要通過調節(jié)體液平衡和血壓來發(fā)揮作用。BNP測量血液樣本中這些蛋白質的含量。它們主要用于幫助確認或排除有癥狀的人是否患有心力衰竭。BNP在科研和臨床發(fā)揮著重要作用。在臨床中,醫(yī)生可以通過檢查BNP水平輔助診斷和檢測心肌梗死及心力衰竭等;在科研領域,通過BNP可以對病理生理研究、新藥物研發(fā)和動物模型研究等促進了對心血管疾病機制和治療策略的深入研究。
BNP試劑盒
BNP試劑盒主要有以下幾種類型,按照檢測原理分為ELISA試劑盒、化學發(fā)光免疫分析試劑盒和化學發(fā)光免疫分析試劑盒。下面逐一為大家介紹不同試劑盒檢測原理。
ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在科研實驗中是比較常見的一種酶聯(lián)免疫測定法。ELISA是利用抗原抗體反應和酶催化反應來定量檢測樣品中目標物質的方法。該試劑盒基于夾心酶聯(lián)免疫吸附測定技術。將抗體預涂在96孔板上。將標準品、測試樣品和生物素偶聯(lián)試劑加入孔中并孵育。然后加入HRP偶聯(lián)試劑,孵育整個板。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的偶聯(lián)物。TMB底物用于量化HRP酶促反應。加入TMB底物后,只有含有足夠BNP的孔才會產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,加入酸性終止液后,該產(chǎn)物變?yōu)辄S色。黃色的強度與板上結合的NT-ProBNP量成正比。在微孔板讀數(shù)器中以450nm的分光光度法測量光密度(OD),由此可以計算出BNP的濃度。
特點:操作相對簡單,靈敏度較高,適用于各種實驗室。
化學發(fā)光免疫分析試劑盒
化學發(fā)光免疫分析(CLIA)是將高靈敏度的化學發(fā)光分析技術與高特異性的免疫分析反應相結合,用于檢測各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物的分析技術。
化學發(fā)光免疫分析(CLIA)試劑盒檢測BNP的原理基于抗原-抗體反應和化學發(fā)光信號檢測。首先,樣本中的BNP(抗原)與試劑盒中的特異性抗BNP抗體結合,這些抗體通常固定在固相載體(如微孔板或磁性顆粒)上。隨后,加入帶有化學發(fā)光標記物的二抗,這些二抗與BNP-抗體復合物進一步結合,形成夾心結構。通過洗滌步驟去除未結合的成分,確保結果的特異性。接下來,加入化學發(fā)光底物,標記物(如辣根過氧化物酶HRP或堿性磷酸酶ALP)催化底物發(fā)生反應,釋放光子(光信號)。最終,光信號由光電檢測器(如光電倍增管或光電二極管)檢測,光信號強度與樣本中BNP的濃度成正比。通過與標準曲線比較,計算出樣本中的BNP濃度。CLIA結合了高靈敏度和高特異性,適用于臨床和科研中的BNP檢測。
化學發(fā)光免疫分析試劑盒特點:靈敏度更高,檢測速度更快,自動化程度較高,適用于大型實驗室或臨床診斷。
免疫層析試劑盒
免疫層析法是一種實驗室檢測方法,很久以前作為側流免疫測定法發(fā)展起來,廣泛應用于需要快速診斷的傳染病。利用膠體金或其他標記物與抗體結合,在試紙條上進行免疫反應,通過肉眼觀察結果。免疫層析試劑盒檢測BNP的原理基于側流免疫測定法(LFIA)。首先,將樣本(如血液或血清)添加到試劑盒的樣本墊上。樣本通過毛細作用沿著硝酸纖維素膜向前移動。樣本中的BNP與試劑盒中標記抗體(如膠體金標記抗體)結合,形成抗原-抗體復合物。復合物繼續(xù)移動,在測試線(T線)區(qū)域與固定的捕獲抗體結合,形成可見的顏色變化或發(fā)出熒光。如果樣本中存在BNP,T線會顯現(xiàn)顏色或熒光。未結合的標記抗體繼續(xù)流動,并在控制線(C線)處被捕獲,確保試劑盒工作正常,C線應始終顯現(xiàn)顏色或熒光。通過觀察T線和C線的顯色情況,可以判定檢測結果為陽性或陰性。這種方法操作簡便、快速,幾分鐘內(nèi)即可獲得結果,廣泛應用于臨床和現(xiàn)場檢測BNP水平。
特點:操作簡便、快速,適用于現(xiàn)場檢測或快速診斷。
BNP試劑盒除了上述之外,還有電化學發(fā)光免疫分析試劑盒和熒光免疫分析試劑盒。不過在科研實驗中常用的是ELISA試劑盒,它具有操作相對簡單,靈敏度較高優(yōu)勢。上海通蔚主要BNP試劑盒采用ELISA試劑盒,如下BNP試劑盒名稱及規(guī)格介紹:
試劑盒名稱
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規(guī)格
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檢測方法
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用途
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豬前腦鈉素(proBNP)試劑盒
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48T/96T
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ELISA
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用于檢測和研究豬體內(nèi)前腦鈉素(proBNP)水平
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小鼠B型氨基端利鈉肽原(NT-proBNP)試劑盒
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48T/96T
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ELISA
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用于檢測小鼠體內(nèi)B型氨基端利鈉肽原(NT-proBNP)水平
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人氮末端腦鈉肽前體(NT-proBNP)試劑盒
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48T/96T
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ELISA
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用于檢測人類血清或血漿中的NT-proBNP水平
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猴N末端B型鈉尿肽(NT-proBNP)試劑盒
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48T/96T
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ELISA
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用于檢測猴體內(nèi)N末端B型鈉尿肽(NT-proBNP)水平
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