夾心ELISA vs 競(jìng)爭(zhēng)性ELISA：兩種ELISA技術(shù)的比較

  ELISA，全稱(chēng)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay）。在生物學(xué)免疫實(shí)驗(yàn)方法中常見(jiàn)的技術(shù)。這種技術(shù)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品安全、環(huán)境檢測(cè)和藥物帥選等領(lǐng)域。

  ELISA基本原理是將抗原或抗體吸附在固相載體上，通過(guò)酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)。那么，elisa有哪些主要類(lèi)型呢？

  在酶聯(lián)吸附測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，elisa主要類(lèi)型有直接ELISA、間接ELISA、競(jìng)爭(zhēng)ELISA和夾心ELISA。比較常用的是夾心ELISA和競(jìng)爭(zhēng)ELISA。上海通蔚針對(duì)這兩種類(lèi)型重點(diǎn)為大家介紹下區(qū)別。如果你想了解ELISA其它類(lèi)型，可以參考《elisa試劑盒有哪幾種類(lèi)型？elisa四類(lèi)型圖解》。

  Elisa夾心法

  Elisa夾心法是將特異性抗體結(jié)合到固相載體上形成固相抗體（捕獲抗體），然后和待檢樣本中的相應(yīng)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，洗滌后再加酶標(biāo)記抗體（檢測(cè)抗體），與免疫復(fù)合物中抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體—抗原—固相抗體復(fù)合物，加底物顯色，判斷抗原含量。整個(gè)過(guò)程中，待檢抗原經(jīng)過(guò)捕獲抗體和檢測(cè)抗體雙重篩選，具有高特異性。

  Elisa夾心法的優(yōu)點(diǎn)是特異性高、靈敏度高，但其主要缺點(diǎn)是捕獲抗體和檢測(cè)抗體之間存在相互作用。

  Elisa競(jìng)爭(zhēng)法

  ELISA競(jìng)爭(zhēng)法預(yù)先將抗原包被在固相載體上，并加入酶標(biāo)記的特異性抗體，實(shí)驗(yàn)時(shí)，加入待檢抗原（或抗體），如果待檢物是抗原，則待檢抗原于預(yù)先包被在固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)抗體，如果待檢測(cè)物是抗體，則待檢抗體就與系統(tǒng)中原有的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合包被在固相載體上的抗原，通過(guò)洗滌洗掉被競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的酶標(biāo)抗體，最后加底物顯色，需要注意的是顯色結(jié)果與待檢抗原（或抗體）的量成反比。

  Elisa競(jìng)爭(zhēng)法的優(yōu)點(diǎn)是適合檢測(cè)小抗原，適合檢測(cè)復(fù)雜樣品，特異性高，靈敏度高。但是，它有一些缺點(diǎn)，例如每次ELISA都需要標(biāo)記抗體，這可能導(dǎo)致抗體失活，隨著靶抗原的增加信號(hào)會(huì)降低。

  Elisa實(shí)驗(yàn)選擇夾心法還是競(jìng)爭(zhēng)法？

  1.根據(jù)待測(cè)物質(zhì)的大小：若待測(cè)物質(zhì)為大分子抗原，如蛋白質(zhì)、多糖等，建議選擇夾心法；若待測(cè)物質(zhì)為小分子抗原或抗體，則競(jìng)爭(zhēng)法可能更為合適。

  2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求：若需要高靈敏度的檢測(cè)，夾心法通常是更好的選擇；若需要進(jìn)行定量或半定量檢測(cè)，競(jìng)爭(zhēng)法則可能更適合。

  3.考慮實(shí)驗(yàn)操作的復(fù)雜性：夾心法相對(duì)復(fù)雜，需要兩種特異性抗體；而競(jìng)爭(zhēng)法則相對(duì)簡(jiǎn)單，但可能需要在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)分析上投入更多精力。

  上述通蔚生物為大家介紹這兩種ELISA類(lèi)型的區(qū)別，作為實(shí)驗(yàn)室較為常用的酶聯(lián)技術(shù)，它們有各自特點(diǎn)。具體使用方法結(jié)合實(shí)驗(yàn)需求及檢測(cè)物質(zhì)大小來(lái)確定。如果您還有關(guān)于這兩種類(lèi)型ELISA其它問(wèn)題，歡迎前來(lái)咨詢(xún)。