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培養(yǎng)基DMEM/F12 和 DMEM 高糖:哪個更適合你的細胞?

發(fā)布時間:2024-07-10     發(fā)布作者:上海通蔚生物

  作為基礎培養(yǎng)基,DMEM培養(yǎng)基是Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基。在細胞培養(yǎng)中,或許會接觸到DMEM高糖和DMEM/F12培養(yǎng)基。那么,他們之間有什么區(qū)別呢?了解它們之間差異,有助于提高細胞培養(yǎng)的成果。

  認識DMEM/F12和DMEM高糖培養(yǎng)基



  DMEM高糖


  DMEM高糖培養(yǎng)基是一種廣泛應用于細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,它是從原始的伊格爾基礎培養(yǎng)基(BME)改良而來,并在其基礎上增加了氨基酸和維生素的濃度,并提高了葡萄糖濃度。DMEM高糖培養(yǎng)基的原始配方含有1000mg/L葡萄糖,主要用于培養(yǎng)小鼠胚胎細胞。隨著研究的深入,DMEM培養(yǎng)基經過多次改良,現在廣泛用于培養(yǎng)各種哺乳動物細胞,包括小鼠、雞和人類細胞。

DMEM高糖培養(yǎng)基


  DMEM高糖培養(yǎng)基的主要特點是

  1.高葡萄糖濃度:DMEM高糖培養(yǎng)基的葡萄糖濃度為4500mg/L,相比標準DMEM的1000mg/L增加了4.5倍,為快速增殖的細胞提供充足的能量來源。

  2.高濃度的氨基酸和維生素:DMEM高糖培養(yǎng)基中包含比標準DMEM更高的濃度氨基酸和維生素,例如谷氨酰胺濃度為2920mg/L,丙酮酸鈉濃度為110mg/L,以及其他必需的氨基酸和維生素,滿足細胞生長的需要。

  3.廣泛適用性:DMEM高糖培養(yǎng)基廣泛應用于培養(yǎng)多種類型的細胞,包括:

  快速增殖的細胞:例如腫瘤細胞、雜交瘤細胞、CHO細胞等。

  懸浮細胞:例如某些白血病細胞、雜交瘤細胞等。

  原代細胞:例如從組織中分離的細胞。

  轉化細胞:例如經過基因轉染的細胞。

  DMEM高糖培養(yǎng)基的典型應用場景包括:

  雜交瘤細胞培養(yǎng):用于生產抗體和治療性蛋白。例如,使用DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠雜交瘤細胞,生產針對特定抗原的單克隆抗體。

  CHO細胞培養(yǎng):用于生產重組蛋白和生物制劑。例如,利用CHO細胞表達重組人促紅細胞生成素(EPO),用于治療貧血。

  疫苗生產:用于生產病毒和細菌疫苗。例如,利用CHO細胞生產乙肝疫苗。

  細胞治療研究:用于培養(yǎng)用于細胞治療的細胞,例如CAR-T細胞。

  DMEM高糖培養(yǎng)基的優(yōu)勢在于其成分豐富、價格實惠,能夠滿足多種細胞類型的培養(yǎng)需求。然而,需要注意的是,對于一些對高濃度葡萄糖敏感的細胞類型,例如神經細胞、原代細胞,建議使用低糖DMEM或其他適合的培養(yǎng)基

  DMEM/F12


  DMEM/F12是一種廣泛應用于細胞培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)基,用于促進多種哺乳動物細胞的生長,包括MDCK細胞、神經膠質細胞、成纖維細胞、人內皮細胞和大鼠成纖維細胞等。


DMEM/F12


  DMEM/F12培養(yǎng)基是由DMEM培養(yǎng)基和Ham'sF-12培養(yǎng)基以1:1的比例混合而成,并對一些成分進行了優(yōu)化。該配方結合了DMEM培養(yǎng)基中高濃度的葡萄糖、氨基酸和維生素,以及Ham'sF-12培養(yǎng)基中更全面的營養(yǎng)成分和生長因子,例如:

  1.高濃度葡萄糖:提供細胞生長所需的能量來源。

  2.必需氨基酸和維生素:滿足細胞合成蛋白質和進行代謝活動的需要。

  3.其他關鍵成分:包括鋅、腐胺、次黃嘌呤、胸苷等,促進細胞生長和分化。

  4.除了DMEM和Ham'sF-12中的成分外,DMEM/F12培養(yǎng)基中通常還會添加一些常見的補充劑,例如:

  5.L-谷氨酰胺:細胞生長不可或缺的營養(yǎng)物質。

  6.酚紅指示劑:用于指示培養(yǎng)基的pH值。

  由于DMEM/F12培養(yǎng)基本身缺乏蛋白質、脂質和生長因子,因此通常需要添加胎牛血清(FBS)來補充這些成分,為細胞提供更完整的生長環(huán)境。此外,DMEM/F12培養(yǎng)基使用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),需要在5-10%的CO2環(huán)境中培養(yǎng),以維持培養(yǎng)基的pH值穩(wěn)定,并模擬細胞在體內的生長環(huán)境。

  DMEM/F12培養(yǎng)基的優(yōu)勢在于:

  1.營養(yǎng)豐富:提供了細胞生長所需的多種營養(yǎng)成分。

  2.廣泛適用性:可以用于培養(yǎng)多種類型的哺乳動物細胞。

  3.可控性:可以通過添加不同的補充劑,來滿足不同細胞類型的培養(yǎng)需求。

  4.DMEM/F12培養(yǎng)基在生物醫(yī)學研究、藥物研發(fā)和細胞治療等領域有著廣泛的應用。例如,它被用于:

  5.藥物篩選:用于測試藥物對細胞的毒性和有效性。

  6.細胞模型構建:用于建立模擬人體組織和器官的細胞模型。

  7.細胞治療研究:用于培養(yǎng)用于細胞治療的細胞。

  DMEM/F12培養(yǎng)基是一種功能強大且用途廣泛的細胞培養(yǎng)基,它通過結合DMEM和Ham'sF-12培養(yǎng)基的優(yōu)點,為各種哺乳動物細胞提供了理想的生長環(huán)境,在生物醫(yī)學領域發(fā)揮著重要的作用。下表是DMEM高糖培養(yǎng)基和DMEM/F12培養(yǎng)基區(qū)別:

  
特性
DMEM高糖培養(yǎng)基
DMEM/F12培養(yǎng)基

葡萄糖濃度

高(通常為4.5 g/L)

中等(通常為1.0 g/L)

成分來源

基于Eagle的最小必需培養(yǎng)基(MEM)修改

DMEM和Ham's F-12的1:1混合

氨基酸

含有較多的氨基酸

含有更全面和豐富的氨基酸和其他營養(yǎng)成分

維生素

含有基本的維生素

含有更廣泛的維生素

礦物質

含有基本的礦物質

含有多種礦物質

緩沖系統(tǒng)

常使用碳酸氫鈉作為緩沖系統(tǒng)

包含HEPES和碳酸氫鈉作為緩沖系統(tǒng)

使用細胞類型

常用于快速生長的細胞(如HeLa, 293T)

常用于慢速生長的細胞和更敏感的細胞(如原代細胞和神經細胞)

應用

廣泛用于各種細胞培養(yǎng)和常規(guī)細胞系的生長

用于需要更復雜營養(yǎng)需求的細胞培養(yǎng),如神經元和肝細胞培養(yǎng)

其他添加物

通常不含生長因子和激素

通常不含生長因子和激素



  DMEM/F12和DMEM高糖培養(yǎng)基選擇


  選擇DMEM/F12還是DMEM高糖培養(yǎng)基,需要根據您的具體實驗需求和細胞類型來決定。以下是一些關鍵考慮因素:

  1.細胞類型:

  快速增殖的細胞:DMEM高糖培養(yǎng)基更適合快速增殖的細胞,例如腫瘤細胞、雜交瘤細胞、CHO細胞等。其高濃度的葡萄糖能夠為這些細胞提供充足的能量,促進它們的快速生長。

  對葡萄糖濃度敏感的細胞:DMEM/F12培養(yǎng)基更適合對葡萄糖濃度敏感的細胞類型,例如神經細胞、原代細胞等。高濃度的葡萄糖可能會對這些細胞的生長和分化產生負面影響。

  其他細胞類型:對于一些特定類型的細胞,例如上皮細胞、內皮細胞等,可能需要根據具體情況選擇合適的培養(yǎng)基。

  2.實驗目的:

  長期培養(yǎng):DMEM/F12培養(yǎng)基更適合長期培養(yǎng),因為其低葡萄糖濃度可以減緩細胞的增殖速度,并維持細胞的穩(wěn)定性。

  細胞分化:DMEM/F12培養(yǎng)基更適合進行細胞分化實驗,因為其低葡萄糖濃度可以更好地模擬細胞在體內的生長環(huán)境。

  快速增殖:DMEM高糖培養(yǎng)基更適合需要快速增殖細胞的實驗,例如腫瘤細胞增殖研究、抗體生產等。

  3.培養(yǎng)條件:

  CO2濃度:DMEM/F12培養(yǎng)基和DMEM高糖培養(yǎng)基都通常需要在5-10%的CO2環(huán)境中培養(yǎng)。

  4.成本:

  DMEM高糖:通常比DMEM/F12更便宜。

  如果需要培養(yǎng)快速增殖的細胞,DMEM高糖培養(yǎng)基通常是更合適的選擇。如果需要培養(yǎng)對葡萄糖濃度敏感的細胞,或進行長期培養(yǎng)、細胞分化等實驗,DMEM/F12培養(yǎng)基更合適。

  上述為大家介紹了DMEM/F12和DMEM高糖培養(yǎng)基區(qū)別,在細胞培養(yǎng)中選擇合適的細胞培養(yǎng)基非常重要,希望上述內容對你有所幫助,可以提高您細胞培養(yǎng)的效率和成功。上海通蔚,品質保證!DMEM/F12營養(yǎng)豐富,適合多種哺乳動物細胞培養(yǎng),尤其適合長期培養(yǎng)和細胞分化實驗。DMEM高糖,專為快速增殖細胞而設計,為您的科研提供更多選擇!我們價格實惠,歡迎來選購!