科研必備：RPMI-1640 培養(yǎng)基深度解析

  上文提到到基本培養(yǎng)基DMEM，這種培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用比較廣泛。今天，上海通蔚生物來說下RPMI-1640培養(yǎng)基，它和DMEM培養(yǎng)基都屬于體外培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。通過RPMI-1640培養(yǎng)基的歷史由來、成分和DMEM區(qū)別來詳解。

  RPMI-1640培養(yǎng)基的歷史由來

  RPMI1640，簡稱RPMI培養(yǎng)基，是一種常用于培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)基。 RPMI1640由GeorgeE.Moore、RobertE.Gerner和H.AddisonFranklin于1966年在羅斯威爾公園綜合癌癥中心（前身為羅斯威爾公園紀(jì)念研究所）開發(fā)，并由此得名。?McCoy5A培養(yǎng)基（或RPMI1630）的改良版，最初配制用于支持懸浮培養(yǎng)中的類淋巴母細(xì)胞，但也可以支持多種貼壁細(xì)胞。

  RPMI-1640培養(yǎng)基成分組成

  RPMI-1640培養(yǎng)基的成分組成相當(dāng)豐富，主要包括以下幾類：

  1.氨基酸:

  必需氨基酸:L-精氨酸、L-胱氨酸、L-谷氨酰胺、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-纈氨酸

  非必需氨基酸:L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、甘氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸

  2.維生素:

  生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12、膽堿、肌醇、維生素A、維生素D3、維生素E、維生素K

  3.無機(jī)鹽和微量元素:

  氯化鈣、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈉、磷酸氫二鈉、硫酸鈉、硝酸鐵、硫酸鋅、硫酸銅、鉬酸鈉、硒酸鈉

  4.其他成分:

  葡萄糖：提供細(xì)胞能量來源

  酚紅：pH指示劑，顏色隨pH值變化而變化

  碳酸氫鈉：緩沖系統(tǒng)的一部分，維持培養(yǎng)基pH值穩(wěn)定

  5.可選成分:

  丙酮酸鈉：額外的能量來源

  HEPES：另一種緩沖劑，可在無CO2環(huán)境中使用

  牛血清或其他血清：提供生長因子、激素和其他細(xì)胞生長所需的物質(zhì)

  RPMI-1640培養(yǎng)基和其它培養(yǎng)基區(qū)別在那里

  RPMI-1640培養(yǎng)基與其他常用培養(yǎng)基（如DMEM、MEM等）在成分、應(yīng)用和培養(yǎng)條件等方面存在一些區(qū)別:

  1.營養(yǎng)成分:

  葡萄糖濃度:RPMI-1640的葡萄糖濃度(2g/L)比DMEM(1g/L)和MEM等培養(yǎng)基更高，更適合于快速生長的細(xì)胞，例如淋巴細(xì)胞。

  氨基酸:RPMI-1640包含更多種類和更高濃度的氨基酸，尤其是非必需氨基酸，使其更適合于對(duì)營養(yǎng)要求較高的細(xì)胞。

  維生素:RPMI-1640也含有更高濃度的維生素，例如B族維生素。

  2.緩沖系統(tǒng):

  RPMI-1640:主要使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，需要在含5%CO2的環(huán)境中才能有效維持pH值穩(wěn)定。

  DMEM和MEM:通常使用HEPES緩沖系統(tǒng)，可以在無CO2環(huán)境中維持pH值穩(wěn)定。

  3.應(yīng)用:

  RPMI-1640:更常用于培養(yǎng)懸浮細(xì)胞，例如淋巴細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞和一些白血病細(xì)胞系，也適用于一些貼壁細(xì)胞。

  DMEM:更常用于培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，例如成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞等。

  MEM:適用于多種細(xì)胞類型，包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。

  4.其他區(qū)別:

  滲透壓:RPMI-1640的滲透壓略高于DMEM和MEM。

  無機(jī)鹽:RPMI-1640含有更高濃度的某些無機(jī)鹽，例如磷酸鹽和硫酸鹽。

  選擇培養(yǎng)基的考慮因素

  細(xì)胞類型:不同細(xì)胞類型對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同。

  實(shí)驗(yàn)?zāi)康?例如，研究細(xì)胞生長或代謝可能需要不同的培養(yǎng)基。

  培養(yǎng)條件:是否需要CO2培養(yǎng)環(huán)境。

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