三明治夾心法ELISA法能否捕捉大腸桿菌蹤跡？一文帶你了解

  ELISA 代表酶聯(lián)免疫吸附測定。 ELISA 有多種類型，包括夾心 ELISA、間接 ELISA、直接 ELISA 和競爭ELISA，所有這些都用于檢測抗體。那么，為什么 ELISA 三明治檢測與流行的午餐菜單項目相關(guān)呢？它被稱為三明治，因為它使用兩種抗體，它們之間結(jié)合有抗原（有點像三明治）,不過在常規(guī)的叫法中，我們叫它夾心ELISA。請繼續(xù)閱讀，了解有關(guān) ELISA 夾心測定的更多信息、它與其他類型的不同之處以及其過程是什么樣的。同時我也會給你介紹一下它能否檢測大腸桿菌。關(guān)于elisa試劑盒類型，可以參考這篇文章《elisa試劑盒有哪幾種類型？elisa四類型圖解》

  夾心ELISA檢測的目的

  任何 ELISA 都用于發(fā)現(xiàn)樣本中的目標抗原。然而，在夾心測定中，抗原結(jié)合在檢測抗體和捕獲抗體之間。一般來說，捕獲抗體固定在微孔板上。相反，檢測抗體（與酶或熒光團標記結(jié)合）作為檢測前的最后一步應用。與其他 ELISA 類型相比，夾心法更具特異性和敏感性，更適合更復雜的情況。

  夾心法elisa檢測流程

  在大多數(shù)情況下，夾心測定過程如下：

  1、涂上捕獲抗體。表面可以是磁珠或多孔板。孵育后，應清洗未結(jié)合的抗體以提高靈敏度。

  2、阻止表面上未結(jié)合的蛋白質(zhì)結(jié)合面。使用封閉緩沖液，例如牛血清白蛋白 (BSA)、酪蛋白或胎牛血清 (FBS)，有助于減少背景和非特異性結(jié)合。

  3、添加目標抗原（樣品）。首先孵育，使目標抗原能夠與捕獲抗體結(jié)合。然后，洗滌以除去未結(jié)合的抗原。

  4、添加檢測抗體標記結(jié)合物。然后，孵育并洗滌。

  5、檢測。測量吸光度、熒光、顯色或化學發(fā)光讀數(shù)。

  夾心法ELISA 測定法的優(yōu)點和缺點

  夾心檢測的最大優(yōu)點是其靈敏度（也稱為檢測限）。如果您的一抗和二抗對具有高親和力和特異性，則靈敏度會顯著提高。

  夾心測定的一個缺點是二抗可能會產(chǎn)生錯誤的讀數(shù)，因為一抗和二抗不具有高特異性和親和力。在這種情況下，二抗可能會與捕獲抗體結(jié)合，從而給出錯誤的讀數(shù)。如果想了解一抗和二抗，可以參考《科研實驗必備知識：一抗與二抗的區(qū)別》

  夾心法ELISA能檢測大腸桿菌嗎

  大腸桿菌是一種細菌，具有特定的抗原決定簇。如果我們可以獲得針對這些抗原決定簇的特異性抗體，那么理論上是可以使用夾心法ELISA來檢測大腸桿菌的。實際上，已經(jīng)有研究報道了使用夾心法ELISA來檢測大腸桿菌或其相關(guān)抗原的方法[1]。

  如果你打算進行這方面的研究，建議查閱相關(guān)的文獻報道，以獲取更詳細的信息和實驗指導。當然也可以咨詢我們在線ELISA顧問，我們也可以為您提供這方面的試劑盒檢測服務。

參考文獻和注釋

  Kerr P、Chart H、Finlay D 等人。動物和人大腸桿菌O157菌株單克隆夾心ELISA檢測方法的建立[J].應用微生物學雜志, 2001, 90(4): 543-549?！?a target="_blank">谷歌學術(shù)】